Post by jone447 on Aug 2, 2023 1:54:49 GMT -5
血浆胰岛素、ALT（生物测定）、AST（生物测定）、甘油三酯、胆固醇和NEFA水平，从下颌下静脉的非肝素化毛细管中采集血液。添加 EDTA 至终浓度 5 mM 作为抗凝剂。然后通过 8,000 g 离心 4 分钟分离血浆。使用商业套件进行测量。根据制造商的说明，通过比色测定法测量血浆胆固醇（Infinity TM胆固醇试剂盒）、甘油三酯（Infinity TM甘油三酯试剂盒）、NEFA (Wako) 和胆汁
酸 (Dyazyme)。使用Contour血糖仪(Bayer)测亚洲手机号码列表量血糖。 体内VLDL分泌测定 小鼠禁食 6 小时，并在注射后在图中和图例中指定的时间点采集血液之前，静脉注射脂肪酶抑制剂泰洛沙泊（500 mg/kg；Sigma）。收集的血样用于TG和TC测量，并且根据血浆TG和TC与时间曲线的斜率计算VLDL-TG和-TC产生率。 代谢标记 将从 WT 和 Tial1 LKO 小鼠分离夜，用 PBS
洗涤两次，并在不含蛋氨酸/半胱氨酸的培养基中孵育 2 小时。然后用每孔 150 μCi 的[ 35 S]-甲硫氨酸/半胱氨酸（Expre 35 S 35 S；PerkinElmer）脉冲细胞 2 小时，并用 PBS 洗涤后在全肝细胞培养基中追踪 6 小时。收获代谢标记的细胞并在 1 × NP40 裂解缓冲液（50 mM HEPES、pH 7.5、150 mM KCl、0.5 mM EDTA、1 mM NaF、0.